La conformació cel·lular implica els passos d'injecció, conformació i obtenció cel·lular. Les cèl·lules del matràs de cultiu cel·lular han de créixer i desenvolupar-se fins a cert punt. En aquest moment, cal confiar en la tripsina per digerir les cèl·lules de la paret exterior del matràs i després sentir-la. En el cas dels enzims, s'ha de controlar el temps de digestió.
Matràs de cultiu cel·lular T75
La tripsina pertany a una classe diferent de tripsina, que pot degradar proteïnes de les membranes cel·lulars fusionades als flascons de cultiu cel·lular. En dissoldre la proteïna a la part corresponent, la proteïna a la unió entre les proteïnes es dissol i la cèl·lula es torna esfèrica a causa de la força de suport del marc cel·lular de la seva pròpia estructura interna, separant així les cèl·lules. El nivell de digestió de la tripsina és un factor clau en la formació de les cèl·lules: una digestió excessiva augmenta les restes cel·lulars, les restes negres augmenten, les cèl·lules cauran en conjunt, posant seriosament en perill la viabilitat cel·lular i algunes cèl·lules floten, amb la sortida de tripsina descartada; si la digestió no és suficient, és difícil que les cèl·lules es desprenguin des de la paret interior de l'ampolla, i el bufat i el cop continus també danyaran l'activitat cel·lular.
matràs de cultiu cel·lular
Ampolla de solució de cultiu de proteïnes sèriques
En diferents institucions o cèl·lules, l'efecte dels enzims pancreàtics no és el mateix. L'activitat de les cèl·lules disperses de l'enzim pancreàtic també està relacionada amb el seu valor de concentració, temperatura i durada de l'efecte. Quan el pH és de 8.0 i la temperatura és de 37, el nivell d'eficàcia de la solució aquosa de l'enzim pancreàtic és relativament fort. Quan s'aplica tripsina, la concentració, la temperatura i la durada s'han de controlar bé per evitar el dany cel·lular causat per una digestió excessiva. Com que el Ca2, Mg2 i la proteïna sèrica, els grams de proteïna redueixen l'activitat de la pancreatina, de manera que quan es prepara una solució aquosa de pancreatina, utilitzeu BSS sense Ca2, Mg2, com ara: solució D-Hanks. Quan s'atura la digestió, la tripsina es pot aturar amb un medi de cultiu cel·lular de proteïnes sèriques o un retardador de tripsina per aturar l'efecte de la tripsina a les cèl·lules.
matràs de cultiu
Matràs de cultiu cel·lular T25
A més, si es tracta d'una cèl·lula acabada de comprar, podeu utilitzar una concentració més baixa de tripsina per explorar primer el temps de digestió i observar si les cèl·lules es tornen rodones cada minut i fer un bon registre. Tot plegat, a l'hora d'obtenir les cèl·lules al matràs de cultiu cel·lular, cal controlar el temps de tripsinització, per tal de mantenir eficaçment la viabilitat de les cèl·lules.
