Requisits bàsics per a la recollida de mostres
1. Els exemplars dels casos hospitalitzats són recollits pel personal mèdic de l'hospital on es troben, i els exemplars de contactes propers són recollits per l'agència local de control de malalties i la institució mèdica designada. Quan es recullen mostres, s'han d'establir diferents àrees de mostreig segons els diferents objectes de recollida. Els pacients amb febre van a les clíniques de febre per al tractament i la presa de mostres. Les institucions que no tinguin clíniques de febre haurien d'establir àrees de mostreig especials per a pacients amb febre i mostrejar pacients amb febre i altres grups de proves per evitar la intersecció. infecció. 2. Les persones infectades asimptomàtiques, el personal d'entrada i els contactes propers haurien de recollir hisops nasofaríngies per a la prova d'àcid nucleic durant l'aïllament i l'observació. S'han de recollir dues mostres de hisop nasofaríngei al mateix temps quan s'allibera l'aïllament i s'han d'utilitzar diferents reactius de detecció d'àcids nucleics per a la prova respectivament. En principi, les proves secundàries les realitzen diferents institucions de proves. 3. Segons les necessitats de les proves clíniques i de laboratori, es poden prendre diverses mostres durant l'hospitalització i l'aïllament, i es poden recollir múltiples mostres, com ara les vies respiratòries, la sang i les femtes al mateix temps. El personal de mostreig ha de seguir estrictament les especificacions de mostreig per recollir mostres per assegurar-se que la qualitat de les mostres recollides compleix els requisits. Al mateix temps, haurien d'enregistrar la informació de l'examinat en detall i poden utilitzar l'escaneig de codis de barres i altres mètodes d'informació per recollir informació rellevant. 4. Per al cribratge de població, els tubs de mostreig s'han de determinar segons els requisits dels reactius utilitzats per a l'extracció i detecció d'àcids nucleics, i es poden seleccionar tubs de mostreig que continguin agents inactivadors de virus (sals de guanidina o tensioactius, etc.). La mostra utilitzada per a l'aïllament del virus s'ha de col·locar en un tub de mostreig que no contingui agent d'inactivació del virus. 5. Els articles i la vigilància ambiental s'han de basar en els propòsits de seguiment i les necessitats de prevenció i control per determinar els elements de mostreig, la ubicació i la quantitat, el mostreig ha de seguir estrictament les especificacions de mostreig.
(4) Tipus d'exemplars recollits. Cada cas ha de recollir mostres de vies respiratòries agudes (incloses mostres de vies respiratòries superiors o mostres de vies respiratòries inferiors). En casos greus, primer s'han de recollir mostres de les vies respiratòries inferiors; Es poden recollir mostres de femta, mostres de sang sencera, mostres de sèrum i mostres de femta segons les necessitats clíniques. Exemplar d'orina. Els articles i els exemplars ambientals es recullen segons els requisits de seguiment.
Tipus d'exemplars: 1. Mostres de les vies respiratòries superiors: incloent hisopos nasofaríngies, hisops de gola, etc. 2. Mostres de vies respiratòries inferiors: esputo de tos profunda, líquid de rentat alveolar, líquid de rentat bronquial, aspirat de les vies respiratòries, etc. 3. Mostres de femta/anal. hisops: s'han de recollir uns 10 grams (la mida dels cacauets). Si no és convenient conservar les mostres de femta, es poden recollir hisops anals. 4. Mostra de sang: sang anticoagulant, el volum de recollida és de 5 ml, es recomana utilitzar un vas sanguini al buit que contingui anticoagulant EDTA per recollir sang. 5. Mostres de sèrum: intentar recollir mostres de sèrum doble durant les fases aguda i de recuperació. El primer sèrum s'ha de recollir el més aviat possible (preferiblement dins dels 7 dies posteriors a l'aparició de la malaltia), i el segon sèrum s'ha de recollir en les 3 o 4 setmanes posteriors a l'aparició de la malaltia. El volum de recollida és de 5 ml i es recomana utilitzar un tub de recollida de sang al buit sense anticoagulant. Les mostres de sèrum s'utilitzen principalment per a la determinació d'anticossos i no detecció d'àcids nucleics. 6. Mostra d'orina: recull l'orina de mig matí, el volum de recollida és de 2 ~ 3 ml. 7. Espècimens de superfície: incloent aliments importats de la cadena de fred o béns importats a les superfícies interiors i exteriors dels envasos, així com eines de transport i emmagatzematge i altres parts que puguin estar contaminades per la recollida de frotis. 8. Mostres d'aigües residuals: d'acord amb la distribució del sistema de drenatge dels llocs de tractament i tractament de mercaderies congelades importades a gran escala al port, centreu-vos en seleccionar la sortida d'aigües residuals, la recollida de la xarxa interna de canonades, aigües avall del flux d'aigües residuals o el connexió amb la xarxa de canonades municipals, etc. De 2 a 3 punts Es mostren bits.
(4) Recollida i processament de mostres
1. Hisopió nasofarínge: el recol·lector de mostres recolza suaument el cap de la persona que es vol recollir amb una mà, i amb l'altra subjecta el hisop. El hisop entra a la fossa nasal i s'enfonsa lentament per la part inferior del conducte nasal inferior. Com que el pas nasal és corbat, no és acceptable. Força excessiva per evitar un sagnat traumàtic. Quan la punta del hisop arriba a la paret posterior de la cavitat nasofaríngia, gireu-la suaument durant una setmana (en cas de tos reflexa, romangueu una estona), després traieu lentament el hisop i submergiu el cap del hisop en 2~3 ml. solució de preservació del virus (també es pot utilitzar solució salina isotònica, líquid de cultiu de teixits o tampó de fosfat), descarteu la cua i enrosqueu el tap amb força.
2. Esponja faríngia: la persona que es recull s'ha d'esbandir la boca amb solució salina normal, i la persona que pren la mostra ha d'humitejar el hisop en solució salina estèril (està prohibit posar el hisop a la solució de preservació del virus per evitar que els antibiòtics provoquin al·lèrgies) i el persona que està recollida Inclineu lleugerament el cap, obriu la boca i feu un"ah" so, exposant les amígdales als dos costats, poseu el hisop a la base de la llengua, netegeu les amígdales a banda i banda de la persona amb una mica de força almenys 3 vegades i, a continuació, netegeu la faringe posterior amunt i avall durant almenys 3 vegades. A continuació, submergiu el capçal d'hisop en un tub que contingui de 2 a 3 ml de solució de preservació del virus (també es pot utilitzar una solució salina isotònica, un líquid de cultiu de teixits o una solució tampó de fosfat), descarteu la cua i enrosqueu bé la tapa del tub. El hisop de gola també es pot col·locar al mateix tub que el hisop nasofaríngi.
3. Extracte nasofaringe o extracte de les vies respiratòries: Utilitzeu un col·lector connectat a una bomba de pressió negativa per extreure moc de la nasofaringe o extreure secrecions respiratòries de la tràquea. Introduïu el cap del col·lector a la cavitat nasal o tràquea, activeu la pressió negativa, gireu el cap del col·lector i retireu-lo lentament, recolliu la mucositat extreta i esbandiu el col·lector una vegada amb 3 ml de líquid de mostreig (també podeu utilitzar un líquid pediàtric). catèter connectat a una xeringa de 50 ml Col·lector alternatiu).
4. Esput de tos profunda: després que el pacient tingui una tos profunda, recolliu l'esput tossit en un tub de mostreig que conté 3 ml de líquid de mostreig. Si l'esput no es recull al líquid de mostreig, es poden afegir de 2 a 3 ml del líquid de mostreig abans de la prova, o es pot afegir un volum igual de suc digestiu d'esput. La fórmula de la solució d'emmagatzematge del suc digestiu d'esput es mostra a la taula 1.
Quan utilitzeu, diluïu la solució d'emmagatzematge a 50 ml amb aigua desionitzada, barregeu-la amb el mateix volum d'esput, o consulteu les instruccions d'ús dels reactius o utilitzeu un volum igual d'esput amb 1 g/L de proteïna K que conté tampó fosfat per convertir-lo. l'esput.
5. Líquid de rentat bronquial: introduïu el capçal del col·lector des de la fosa nasal o la presa de la tràquea a la tràquea (uns 30 cm de profunditat), injecteu 5 ml de solució salina normal, activeu la pressió negativa, gireu el capçal del col·lector i retireu-lo lentament, reculli el moc extret, I netegeu el col·lector amb la solució de mostreig una vegada, o podeu utilitzar un catèter pediàtric connectat a una xeringa de 50 ml per substituir la col·lecció.
6. Líquid de rentat alveolar: després de l'anestèsia local, introduïu el broncoscopi de fibra òptica per la boca o el nas a través de la faringe al bronqui del lòbul mitjà dret o del segment lingual del pulmó esquerre i colpeu-ne la part superior a l'obertura de la branca bronquial i afegiu-lo lentament. a través del forat de la biòpsia traqueal. Solució salina fisiològica bacteriana, 30-50 ml cada vegada, total 100-250 ml, no ha de superar els 300 ml.
7. Mostra de femta: agafeu 1 ml de solució de processament de mostres, agafeu la mostra de femta de la mida de la soja i afegiu-la al tub, bufeu-la suaument i xucleu-la de 3 a 5 vegades, deixeu-la reposar a temperatura ambient durant 10 minuts, centrifugueu a 8000 rpm durant 5 minuts i absorbir el sobrenedant. Detecció. La solució de tractament de mostres fecals es pot preparar per si mateixa i la fórmula es mostra a la taula 2.
La solució HANK'S o una altra solució salina isotònica, fluid de cultiu de teixits o solució tampó de fosfat també es poden utilitzar per dissoldre la mostra de femta per preparar una suspensió de femta. Si el pacient té símptomes de diarrea, agafeu 3 ~ 5 ml d'espècimen fecal, pipeteu suaument per barrejar, centrifugueu a 8000 rpm durant 5 minuts i absorbiu el sobrenedant per utilitzar-lo.
8. Hisop anal: utilitzeu un hisop de cotó estèril per inserir-lo suaument a l'anus 3~5 cm, després gireu-lo suaument, immediatament poseu-lo en un tub de mostreig de tap de rosca exterior de 15 ml que conté 3~5 ml de solució de preservació del virus, descarteu la cua, i gira-lo. Premeu la tapa del tub.
9. Mostres de sang: es recomana utilitzar tubs de recollida de sang al buit que continguin anticoagulant EDTA per recollir mostres de sang de 5 ml. Segons el tipus de reactius d'extracció d'àcids nucleics seleccionats, utilitzeu sang sencera o plasma per a l'extracció d'àcids nucleics. Per separar el plasma, centrifugueu la sang sencera a 1500-2000 rpm durant 10 minuts i recolliu el sobrenedant en un tub de plàstic estèril amb rosca.
10. Mostra de sèrum: Recolliu 5 ml de mostra de sang amb un tub de recollida de sang amb pressió negativa al buit, deixeu-lo a temperatura ambient durant 30 minuts, centrifugueu a 1500-2000 rpm durant 10 minuts i recolliu sèrum en un tub de plàstic estèril de rosca.
11. Espècimens de superfície: Consulteu el mètode recomanat al"Especificacions tècniques per a la vigilància ambiental del nou Coronavirus en el mercat de comerç agrícola (comerç de mercat)" (WS/T776—2021). Després que el hisop de mostreig s'hagi infiltrat completament amb la solució de preservació del virus, torneu a aplicar-lo a la superfície i després apliqueu el hisop. Torneu-lo a posar al tub de mostreig i remulleu-lo, traieu-lo i torneu a aplicar la mostra, repetiu-ho més de 3 vegades. El mostreig distribuït multipunt es realitza en objectes amb grans superfícies.
12. Espècimens d'aigües residuals: Consulteu els mètodes recomanats al"Especificacions tècniques per al seguiment ambiental del nou coronavirus al mercat de comerç agrícola (comerç de mercat)" (WS/T776—2021). Quan recolliu una mostra d'aigües residuals, submergiu l'escut a les aigües residuals adsorbides i traieu-lo. Torneu a posar el tub de mostreig en remull, traieu-lo i submergiu-lo de nou a les aigües residuals, repetiu-ho més de 3 vegades i feu un mostreig distribuït en diversos punts per a cada lloc de mostreig d'aigües residuals. Quan recolliu mostres d'aigües residuals, utilitzeu ampolles de plàstic de polietilè per recollir 1L ~ 1,5L d'aigües residuals. Per a la recollida d'aigües residuals de més d'1,5 L, podeu utilitzar galledes de plàstic de polietilè o equips especials d'enriquiment per a mostres d'aigua in situ. Abans de recollir mostres d'aigües residuals, s'han de barrejar a fons i després prendre mostres; si les aigües residuals són difícils de barrejar bé i es produeix una estratificació, el mostreig es pot fer per capes segons la proporció del volum d'aigua de cada capa.
13. Altres materials: recollir segons els requisits i especificacions del disseny.
(5) Embalatge de mostres
Després de recollir les mostres, s'envasen a l'armari de seguretat biològica del laboratori de seguretat biològica de segon nivell.
1. Totes les mostres s'han de col·locar en un tub de recollida de mostres de mida adequada amb un tap de rosca i una junta a l'interior, que sigui resistent a la congelació, i estrènyer. El número de mostra, el tipus, el nom i la data de presa de mostres s'indiquen a l'exterior del recipient. 2. Posa les mostres segellades en una bossa segellada, cada bossa està limitada a un exemplar. Els requisits d'embalatge de la mostra han de complir els estàndards corresponents de la"Normes tècniques per al transport segur de mercaderies perilloses per aire". 3. Quan es produeixi el transport d'espècimens externs, s'ha d'embalar en tres capes segons el tipus d'exemplars i les substàncies infeccioses de classe A o classe B.
(6) Conservació d'exemplars
Les mostres utilitzades per a l'aïllament del virus i la detecció d'àcids nucleics s'han de provar tan aviat com sigui possible. Les mostres que es poden provar en 24 hores es poden emmagatzemar a 4 °C; Les mostres que no es puguin detectar en 24 hores s'han d'emmagatzemar a -70 °C o menys (si no, emmagatzemar a 70 °C a la nevera a -20 °C). Les mostres de sèrum es poden emmagatzemar a 4 °C durant 3 dies i es poden emmagatzemar durant molt de temps per sota dels -20 °C. S'han d'establir biblioteques especials o comptadors especials per emmagatzemar mostres per separat.
(7) Presentar exemplars per a la inspecció
Les mostres s'han d'enviar al laboratori tan aviat com sigui possible després de la recollida, i les mostres no s'han de col·locar a temperatura ambient (25 °C) durant més de 4 hores després de la recollida. Si es requereix un transport a llarga distància, es recomana utilitzar gel sec i altres mètodes de refrigeració per a l'emmagatzematge. Eviteu les congelacions i descongelacions repetides durant el transport de mostres.
1. Enviar exemplars
Tots els casos originals o primerencs d'epidèmies locals descoberts a diverses províncies (comunitats autònomes i municipis), casos clau relacionats amb l'epidemiologia dels primers casos, casos locals amb fonts d'infecció desconegudes, casos importats de l'estranger, béns importats i medi ambient relacionats. Espècimens positius, etc. S'han de recollir almenys 2 exemplars en paral·lel, un s'envia a cada agència provincial de control de malalties per a la prova, l'altre s'envia als Centres de Control i Prevenció de Malalties de la Xina per a la prova i la revisió, i un formulari d'enviament de mostra. s'adjunta (vegeu l'Annex 10-1). Les noves soques representatives aïllades de diverses províncies s'han d'enviar ràpidament als Centres de Control i Prevenció de Malalties de la Xina per a la seva revisió i preservació.
2. Transport d'exemplars i soques
(1) El transport intern de noves soques de coronavirus o altres materials biològics potencialment infecciosos es classifica com a Classe A i el número ONU corresponent és UN2814. L'embalatge s'ajusta a la classificació PI620 del document OACI Doc9284"Instruccions tècniques per al transport segur de mercaderies perilloses per via aèria" Requisits d'embalatge: les mostres ambientals pertanyen a la categoria B i el número ONU corresponent és UN3373. L'embalatge compleix els requisits de classificació PI650 del document OACI Doc9284"Normes tècniques per al transport segur de mercaderies perilloses per via aèria"; es pot fer referència a l'embalatge estàndard anterior per al transport amb altres mitjans de transport. El transport de noves soques de coronavirus o d'altres materials potencialment infecciosos s'ha de gestionar d'acord amb el"Reglaments administratius sobre el transport d'espècies o mostres de microorganismes altament patògens (virus) que poden infectar humans" (antiga Ordre núm. 45 del Ministeri de Sanitat) per al"Certificat de permís de transport" .
(2) Transport internacional Els exemplars o soques del nou coronavirus que es transportin internacionalment s'embalaran de manera estandarditzada, seguiran els procediments pertinents d'acord amb el"Reglament de l'Administració Sanitària i Quarantena d'Entrada i Sortiu dels articles especials" i compliu els requisits nacionals i internacionals rellevants.
(3) Recepció i gestió d'exemplars i soques de virus. Els exemplars transportats per via aèria arriben a l'aeroport de destinació i són transportats amb vehicles de transport professionals fins a la unitat receptora. Els exemplars transportats per terra es transporten amb vehicles professionals. Els transportistes i receptors hauran de tractar els exemplars Doble senyal de recepció. Les mostres i les soques del nou coronavirus han de ser gestionades per una persona dedicada, registrar amb precisió la font, el tipus, la quantitat i el nombre de registre de les mostres i les soques, prendre mesures efectives per garantir la seguretat de les soques i les mostres i prevenir estrictament ús indegut, ús maliciós, robatori i robatori. Robatoris, pèrdues, fuites i altres incidents.
02
Proves de laboratori del nou coronavirus
