Maneres d'evitar la contaminació cel·lular: consells de pipetes que cal saber
Entre les moltes variables que es controlen en el cultiu cel·lular, una variable específica afecta tot l'experiment: la contaminació. Un factor que contribueix a la contaminació cel·lular no sempre es troba al radar i, tot i que pot afectar silenciosament la salut de les cèl·lules i afectar les dades de mesura, és la contaminació del pipeteig.
L'elecció de pipetes, puntes de pipeta i programes de pipeta rep poca atenció a l'hora de dissenyar experiments. Fins i tot una solució general (autoclau) per evitar la contaminació de pipetes pot no ser tan eficaç com es creu habitualment.
La primera regla del cultiu cel·lular: evitar la contaminació. Per què és tan important la tècnica estèril per a un cultiu cel·lular amb èxit?
La tècnica asèptica és l'única manera d'obtenir resultats fiables i reproduïbles. La contaminació pot afectar el creixement cel·lular, el metabolisme i la salut -- cosa que els científics estan interessats a estudiar. Les línies cel·lulars contaminades no tenen les propietats desitjades i funcionen de manera diferent cada vegada, depenent de la gravetat de la contaminació. A més, si els contaminants fan créixer les cèl·lules d'interès, és possible que acabis estudiant l'organisme equivocat.
Amb quins tipus de contaminants es troben sovint els científics?
Les fonts habituals de contaminació són bacteris, llevats i floridura. En el treball de cultiu cel·lular, el més difícil de detectar i eradicar és el micoplasma. Els tipus de contaminació menys comuns inclouen, per exemple, els materials de lixiviació de plàstic en consumibles de laboratori.
Quines són les causes habituals de la contaminació cel·lular?
Una font habitual de contaminació és la pipeta deficient, com ara l'ús de pipetes contaminades i puntes sense filtre. A més, la manca de bones pràctiques de laboratori, com ara una descontaminació inadequada d'instruments com incubadores o armaris de flux laminar, també és un problema. Per eliminar el micoplasma, cal filtrar amb un filtre 0,1 µm en comptes d'un filtre 0,2 µm.
Tres contaminacions de pipeta:
1. Contaminació de pipeta a mostra: la pipeta o la punta de la pipeta contamina la mostra.
Com evitar:
Utilitzeu puntes de filtre estèrils per evitar la contaminació del cos de la pipeta.
Canvieu la punta de la pipeta després de cada mostra.
Autoclau o esterilitzar pipetes regularment amb etanol. Trieu una pipeta compatible amb autoclau.
2. Contaminació de mostra a pipeta: pipetejar la mostra al cos de la pipeta contamina la pipeta.
Com evitar:
Utilitzeu puntes de filtre o puntes de desplaçament positiu per evitar que les mostres entrin al cos de la pipeta.
Quan pipeteu, mantingueu la pipeta en posició vertical. Guardeu la pipeta en posició vertical.
Inclineu l'ampolla quan pipeteu.
Deixeu anar el botó lentament per evitar esquitxar la mostra a la pipeta. Trieu una pipeta equipada amb una funció d'expulsió suau.
3. Contaminació entre mostres: les mostres de pipeta residuals es transfereixen a la següent mostra. Normalment es produeix quan s'utilitza la mateixa punta diverses vegades.
Com evitar:
Canvieu la punta de la pipeta després de cada mostra.
Utilitzeu puntes de filtre o puntes de desplaçament positiu per evitar que la mostra entri al cos de la pipeta i passi a la següent mostra.
Assegureu-vos que la punta de la pipeta estigui segellada a la pipeta per evitar fuites de mostres. Per exemple, la punta de Yongyue Medical.
Hi ha factors de contaminació que els científics potser ni tan sols coneixen?
Sovint no es verifica l'eficiència de l'autoclau i, si l'autoclau no funciona correctament, és possible que les puntes de pipeta autoclaus no siguin estèrils. Els filtres pre-esterilitzats embolcallats en embalatges protectors són l'opció més segura per evitar aquest tipus d'accidents. El procés de pre-esterilització per a puntes de pipeta d'alta qualitat es valida regularment per garantir l'eficiència de la pre-esterilització.
Com les eines de pipetejar i dispensar faciliten als científics la manipulació de mostres en un entorn estèril?
L'elecció de les pipetes i puntes de pipetes adequades pot facilitar el flux de treball asèptic. Les pipetes mèdiques Yongyue són fàcils de netejar i obrir sense eines, la qual cosa accelera la neteja diària. Atès que l'autoclau és més eficaç per eliminar la contaminació que les tovalloletes d'etanol, les pipetes mecàniques Sartorius són totalment autoclavables, la qual cosa significa que podeu descontaminar les vostres pipetes de manera fiable. L'expulsió de la punta suau evita el risc potencial de contaminació per esquitxades quan s'expulsa la punta. Les puntes de filtre pre-esterilitzades protegeixen les vostres mostres de la contaminació creuada. Les puntes mèdiques Yongyue també s'envasen en embalatges a prova de fuites, el que significa que qualsevol contaminació en condicions d'emmagatzematge i lliurament no entrarà en contacte amb les puntes o la caixa de punta.
Com poden els científics evitar la contaminació? Quins són els vostres millors consells per al treball estèril?
En primer lloc, una bona pràctica de laboratori i una planificació acurada dels passos del treball. Assegureu-vos de mantenir només el que es necessita per a un flux de treball específic a l'armari de flux laminar i utilitzar un cultiu cel·lular alhora. A més, les proves regulars de contaminants com el micoplasma us donen tranquil·litat i confiança en els vostres resultats. Quan es treballa en condicions estèrils, els diners gastats en puntes de filtre pre-esterilitzats i reactius estèrils val la pena.
